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  • 탈인산화효소의 신경세포 생존/사멸제어 작용의 기전 연구

    (1340024825)

    2004

    학술연구조성사업(기초학문지원)

    한병희

    서울대학교

    교육인적자원부

    58000000 (58000000)

    최근의 연구 결과 의하면 ERK1/2의 활성화는 ERK1/2에 선택적인 탈인산화효소(phosphatase)인 MAP kinase phosphotase-1 (MKP1)에 의해서 조절됨이 알려져 있음. 여러 연구결과 MKP-1은 허혈과 같은 스트레스 자극에 의해서 발현이 증가하며 또한 세포 사멸을 억제하는 자극에 의해서도 발현이 증가하기 때문에 이 단백질의 작용은 ERK1/2처럼 세포사멸을 유도하거나 또는 억제하는 작용을 보이고 있어서 그 정확한 작용기전을 규명할 필요가 있음. 활성화 산소의 증가에 의해서 MKP-1은 UPS에 의해서 분해되어 ERK1/2의 활성이 증가하는 반면에 ERK1/2 는 MKP-1을 인산화 시켜서 MKP-1의 단백질분해를 억제하여 “feedback mechanism"을 통해서 ERK1/2 활성을 억제할 수 있음이 알려진 바 있음 (그림 3). 따라서 그림 2에서 보는 바와 같이 ERK1/2---MKP-1 는 신경세포의 사멸 및 생존을 결정하는 중요한 인자임.본 연구진의 최근 연구결과에 의하면 천연물질에서 분리한 성분인 polyphenol 성 물질이 여러스트레스성 자극에 의한 신경세포 사멸을 억제는 작용이 있음을 발견하였으며 그 연구결과의 일부는 논문에 발표된 바 있음 (Kang, BMCL in press, 2004). Polyphenol 성분은 항산화작용보다는 직접적으로 세포사멸 신호전달경로에 작용하여 세포사멸을 억제함을 발견하였으며 그 정확한 작용기전은 추가적인 연구가 필요한 실정임. 이 물질들의 화학구조에 따라 베타이밀로이드, 활성화산소, DNA 손상 등에 의해서 유도되는 신경세포 사멸에 특이적인 약리활성을 보였으며 이 결과로 볼 때 이 물질들이 선택적으로 세포사멸

  • 생물공학기술을 이용한 알긴산분해효소 및 알긴산올리고당의 상용화

    (1420017996)

    2004

    중소기업기술혁신개발

    윤종선

    바이오헬릭스

    중소기업청

    59000000 (80000000)

    1. 해양미생물을 이용한 알긴산 분해효소의 개발 및 상용화2. 알긴산 분해효소를 이용한 효소분해 알긴산 올리고당의 상용화3. 알긴산 올리고당을 이용한 응용 제품 개발

  • 벼 글루타티온 전달효소 유전자의 클로닝 및 제초제 해독 작용기구 연구

    (1340010352)

    2004

    학술연구조성사업(기초학문지원)

    중앙대학교

    교육인적자원부

    29000000 (29000000)

    본 연구그룹에서는 지금까지 단백질 공학을 이용하여 인체 글루타티온 전달효소의 해독 작용기구에 대한 연구를 수행하여 왔다. 또한 식물 효소의 연구를 위해 3년전부터 벼로부터도 글루타티온 전달효소를 분리, 정제하여 왔으며 많은 정보를 축적해 왔다. 본 연구그룹의 연구 결과와 벼 게놈 서열분석의 결과로 부터 벼의 cDNA library로부터 가능한 모든 글루타티온 전달효소의 유전자들을 클로닝하며, 대장균 발현계를 이용하여 그들 유전자들을 대량 발현시킨다. 재조합 효소들의 효소학적, 생화학적 특성을 상세히 조사하여 생리적 기능과 제초제에 대한 효소와 인식기구를 조사하여 식물의 해독 작용기구를 밝히고자 한다.

  • 발아기간에 따른 벼(Oryza sativa L.)의 부위별 효소저해활성

    2013

    학술지

    김민영; 이상훈; 장귀영 더 보기

    한국식품영양과학회지

    2013.06.30

    본 연구에서는 발아기간 및 부위별 벼 추출물에 대한 다양한 효소활성 저해효과를 조사하였다. 발아기간은 6일까지로 하였고, 발아된 벼는 왕겨+싹 부위와 현미로 나누어 80% ethanol로 환류 추출하였다. ${\alpha}$-Glucosidase 저해활성은 왕겨+싹 추출물에서 발아 전 26.32%에서 발아 5일차 39.38%로 증가하였으며, ${\alpha}$-amylase 저해활성은 왕겨+싹 추출물에서 발아 전 59.98%에서 발아 5일차 75.32%로 증가하였고, DPP-4 저해활성 또한 왕겨+싹 추출물에서 발아 전 38.80%에서 발아 5일차 47.77%로 증가하여 발아에 의해 효소활성 저해가 증가하였다. ACE 저해활성은 왕겨+싹 추출물에서 가장 높았으며 발아에 의해 증가하였다. Xanthine oxidase 저해활성은 발아가 진행됨에 따라 감소하였다. Lipase 저해활성은 발아 4일차 왕겨+싹 추출물이 36.78%로 무발아 31.72%에 비하여 증가하였다. 본 연구결과 벼를 발아시킬 경우 왕겨+싹에서 성인병 관료 효소를 억제하는 성분이 증가함을 알 수 있었으며, 추후에 어떠한 성분에 의한 것인지에 대한 연구가 수행되어야 할 것으로 판단된다.

  • 용매종류와 효소처리에 따른 쓴메밀 추출물의 항산화 활성 및 a-glucosidase저해활성의 변화

    2009

    학술지

    김지은; 주성일; 서지현 더 보기

    한국식품영양과학회지

    쓴 메밀의 용매에 따른 추출수율은 물 추출물이 39.0%, 70% 에탄올 추출물이 7.0%, 100% 메탄올 추출물이 6.6%로 물 추출 시 수율이 가장 높았으며 효소처리에 의해 추출수율이 크게 향상되어 $\alpha$-amylase 처리 시 95.1%로 가장 높아 가용성 고형분의 함량이 증가하였다. DPPH radical 소거 활성 측정 결과 메탄올과 에탄올 추출물의 $RC_{50}$ 값이 각각 34.0 $\mu g$/mL, 40.5 $\mu g$/mL로 높은 활성을 지닌 것으로 나타났으며, 효소 처리에 의해 활성이 증가되어 $\beta$-glucosidase 처리구와 cellulase 처리구의 $RC_{50}$ 값이 각각 32.3 $\mu g$/mL, 33.0 $\mu g$/mL 으로 나타났다. ABTS radical 소거 활성 측정 결과 100 $\mu g$/mL의 농도에서 메탄올, 70% 에탄올 추출물이 30%가 넘는 활성을 보였으며, 물 추출물의 소거 활성은 낮았고 효소 처리에 의해 활성이 증가하여 $\alpha$-amylase 처리구를 제외한 모든 효소 처리구의 활성이 대조구인 70% 에탄올 추출구보다 활성이 우수하였다. Hydrogen peroxide 소거 활성 측정 결과 $RC_{50}$ 값이 메탄올 추출물이 32.3 $\mu g$/mL, 70% 에탄올 추출물이 35.9 $\mu g$/mL로 높은 소거 활성을 가지는 것으로 나타났으며 효소처리에 의해 소거 활성이 증가하는 것으로 나타났으나 효소 종류에 따른 유의적인 차이는 없었다. 쓴 메밀 추출물의 $\alpha$-glucosidase 저해 활성은 에탄올 추출물의 $RC_{50}$ 값이 59.9 $\mu g$/mL로 가장 높은 저해 활성을 보였으며 $\alpha$-amylase 처리구가 저해 활성이 가장 높았다. HPLC 분석 결과 메탄올 추출물의 rutin 함량이 4,400.3 mg/100 g, quercetin 함량이 71.9 mg/100 g으로 가장 많은 양의 rutin과 quercetin을 함유하고 있는 것으로 나타났으며, 에탄올 추출물 또한 rutin과 quercetin의 함량이 각각 3,459.8 mg/100 g과 56.9 mg/100 g으로 메탄올 추출물과 비슷한 양을 함유하고 있었으며 물 추출물은 상대적으로 적은 양을 함유하고 있었다. 가수분해 효소 처리 시 $\beta$-glucanase 처리구의 rutin의 함량이 5,057.4 mg/100 g으로 가장 높았다. 결과적으로 쓴 메밀의 메탄올과 에탄올 추출물은 항산화 활성이 뛰어나며 항 당뇨에도 효과가 있으며, 효소 처리에 의해 쓴 메밀에서의 수용성 고형분 함량이 크게 증가하며 항산화 활성과 $\alpha$-glucosidase 저해 활성이 증가하는 것으로 나타났다.

  • Paenibacillus polymyxa Seo3-1의 섬유소 분해활성 효소생산 및 활성 최적화

    2015

    학술대회

    최인후

    2015.04.22

    Paenibacillus polymyxa Seo3-1의 섬유소 분해활성 효소생산 및 활성 최적화최인후, 윤하얀, 윤영미, 안종웅, 문윤호, 차영록, 유경단, 이지은, 이경보 Bioenergy Crop Research Institute, National Institute of Crop Science, RDA,199, Muan-ro, Cheonggye, Muan, Jeonnam, 534-833, KoreaTEL: +82-61-450-0192, FAX: +82-61-453-0085, E-mail: mi3710@korea.krAbstract 지구상에 가장 많이 존재하는 천연 유기물인 섬유소는 곰팡이, 세균, 방선균 등 미생물이 생산하는 섬유소 분해효소에 의해 당으로 전환된다. 본 연구에서는 국내의 간척지(서산, 부안, 해남, 군산 등) 토양 및 식물체로부터 섬유소 분해균주를 탐색하여 섬유소 분해활성이 우수한 Paenibacillus polymyxa Seo3-1를 분리, 동정하였다. 또한 본 균주의 효소 생산 최적화를 위해 배양 배지의 질소원과 탄소원, 초기 pH(pH 3~10), 배양온도(20~50℃), 배양시간(2~72 h) 등의 영향을 알아보았다. 그리고 생산된 효소의 기질-효소 반응 최적화를 위해 반응온도(30~90℃)와 pH(pH 4~10)의 영향도 알아보았다. Cellulase 활성은 DNS 분석법을 이용하여 기질-효소반응으로 생성된 환원당 농도를 측정하여 분석하였다. P. polymyxa Seo3-1은 탄소원으로 CMC (Carboxymethyl Cellulose), 질소원 peptone, 배지의 초기 pH 7, 배양온도 40℃, 배양시간 24 h에서 가장 높은 Cellulase 활성을 보였다. 최적 배양조건에서 P. polymyxa Seo3-1이 생산한 효소는 한외여과장치(Sartorius Slice 200, 10 kD MWCO)로 10배 농축 후, NaOH 전처리 기법으로 리그닌이 제거된 단수수버개스를 당화시켰다. 농축된 효소를 30 FPU/g 농도로 당화시켜 HPLC(High Performance Liquid Chromatography, Waters) 분석장치를 이용하여 섬유소 분해능을 측정한 결과, 단수수버개스의 섬유소(0.1 g)가 P. polymyxa Seo3-1이 생산한 효소에 의해 glucose(2.75±0.03 mg), xylose(0.79±0.08 mg), arabinose(1.12±0.05 mg)로 분해됨을 확인하였다. 원효소의 7배 이상의 당화능을 나타내어 산업화에 적합한 농축형 균주이용가능성을 확인하였다. Keywords: 섬유소(Cellulose), 섬유소 분해효소(Cellulase), Paenibacillus polymyxa Seo3-1

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    효소를 이용한 수출용 사과 잔류농약 친환경 제거기술 개발
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  • C1 바이오 전환관련 원천 효소 및 균주 개발

    2018

    김용환

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    에너지환경

    ... 기술 실증에 연계한 사업화 전략을 수립하여 빠르게 사업화에 성공 본 연구는 폐가스 중에 포함된 저가의 일산화탄소를 원료로 이용하여 고부가가치 화합물을 생산할 수 있는 바이오촉매(미생물 및 효소)를 개발하는 것을 목표로 하였으며 이를 위하여 3가지 핵심과제 해결을 목표로 하였다. 첫째로는 일산화탄소를 수화 반응시켜 개미산으로 전환하는 효소 및 유전자를 개발하고, 두 번째로는 세포에서 ...

  • 바이러스성 질환 진단 및 신약개발에 핵심적인 효소활성 분석법 개발

    2011

    민달희

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    생명해양

    그래핀 기반의 차세대 효소 활성 분석법 개발[그래핀 기반의 효소활성 분석법 개발]최근 주목받고 있는 탄소기반나노물질인 그래핀(Graphene)의 특이한 성질에 주목하여, 단일사슬 올리고핵산과 형광표지염료를 선택적으로 흡착 및 소광하는 특성을 활용하여 헬리케이즈(Helicase)효소의 이중가닥 올리고핵산의 풀림활성을 정량적으로 분석하는 시스템을 확립하였다.이를 ...

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    2007

    이정현

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    생명해양

    태평양 심해저에서 찾아낸 DNA 중합효소!유전자 증폭에 필수인 고정밀 DNA중합효소 개발로 유전자공학과 게놈연구의 신뢰도를 높인다.[고정밀 DNA 중합효소를 찾아라!] 게놈 연구, 유전자 공학, 분자생물학의 밑바탕이 되는 유전자 증폭반응을 위해서 필수적인 것이 DNA 중합효소다. 전 세계적으로 50개 이상의 DNA 중합효소들이 호열성 고세균을 포함한 다양한 생물체로부터 ...

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